利用Image J对Western blot条带进行灰度分析

科研人员做的western blot实验一般需要对其结果扫描后进行灰度分析,一般使用的软件为Image J采用Image J 软件对蛋白质印迹实验结果(Western Blot)进行灰度半定量分析,是分子生物学实验中比较常用的方法,可实现对WB实验结果进行准确、简单和快速的分析。

ImageJ分析Westernblot条带图

Step 1:打开Image J, 导入图片→Image→Type→8 bit

Step 2:选择工具框中第一个矩形框选项,选中所有的条带

Step 3:点击Analyze→Gels→Plot Lanes

Step 4:选用工具框中的直线工具,将开口波峰封闭

Step 5:选用工具框中的魔棒工具,点击相应的波峰,相应area值

ImageJ分析Westernblot条带图

Step 1:打开Image J, 导入图片。Image→Type→8 bit

Step 2:扣除背景P→rocess→Subtract Background→选择50 pixels和Lightbackground

Step 3:设定参数→Analyze→Set Measures→按照下图勾选参数

Step 4:设定参数→Analyze→Set scale→unit of length选项改为pixels

Step 5:图像分割→Edit→Invert→选用椭圆或自定义工具选中条带

Step 6:Analyze→Measure→得到 IntDen值
Step 7:重复Step5、6,得到所有条带的IntDen值

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