定量PCR的化学原理

       1.  TaqMan水解探针: 5′ 端 荧光报告基团
               与靶基因特异性结合的序列
3′ 端 淬灭基团

TaqMan水解探针作用机理:

 

 

荧光标记组合:

 

 

 

2. SYBR® Green I 染料是一种荧光 DNA 结合染料,可与双链 DNA 的小沟结合。
与DNA结合的SYBR® Green染料被激发可产生较未结合染料更强的荧光信号。
SYBR® Green I作用机理

实时记录每个循环后荧光信号的变化:

 

 

 

通过熔解曲线检查产物特异性:

 

单一PCR产物的熔解曲线:

 

多个PCR产物的熔解曲线:

阴性对照的作用:

 

荧光定量PCR方法之:SYBR Green还是Taqman?

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